У сухопутной краснокнижной черепахи Никольского пневмония часто вызывается бактериями, такими как Aeromonas hydrophila, Klebsiella spp. и Streptococcus hem. group, а также анаэробами, микобактериями, грибами (например, Aspergillus spp.) и вирусами. Болезнь проходит несколько стадий. Первая стадия, «влажная» или «экссудативная», характеризуется внезапным и острым течением, часто возникающим после кратковременного содержания черепах в холодных условиях без корма. Симптомы могут проявляться через 3-4 дня после неблагоприятного воздействия и иногда приводят к летальному исходу за считанные дни или часы. В субклинической форме пневмония может оставаться незамеченной и перейти во вторую стадию или стать хронической [2, 3, 5, 9].
Своевременная диагностика и понимание механизмов развития пневмонии у рептилий являются важными аспектами ветеринарной практики. Это позволяет быстро выявлять заболевание и проводить эффективное лечение, что значительно увеличивает шансы на выздоровление черепах [2, 3, 4].
Цель данной работы - разработка метода лечения респираторных заболеваний сухопутных черепах перед зимовкой.
Методика исследований. Работа была выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и эпизоотологии Кубанского государственного аграрного университета имени И. Т. Трубилина.
Экспериментальные исследования проводили в центре реабилитации краснокнижной средиземноморской черепахи Никольского - зимующий вид, куда в течение пяти лет с 2020 года по 2024 год поступало около 30 черепах за год с заболеваниями дыхательных путей с разной степенью тяжести.
После осмотра черепах их условно разделили на три группы: первая опытная группа черепах для лечения получала ромашку аптечную (Matricaria chamomilla) с добавлением к общему рациону комплекса витаминов и макро- и микроэлементов; черепахи второй опытной группы имели ярко выраженную симптоматику с полным отсутствием аппетита, которым сразу же назначали антибиотик «Байтрил»; третья группа контрольная - клинически здоровые черепахи.
Байтрил 2,5 % применяли в дозе 0,2 мл/кг, вводили ежедневно внутримышечно в плечо передней лапы в течение 7-10 дней, с учетом индивидуального состояния каждой отдельной особи.
Ромашку аптечную (Matricaria chamomilla) применяли для ингаляции в дозе 50 г/л, первые дни болезни проводили четыре раза в сутки, с экспозицией от 20 до 30 минут. При положительной динамике и заметного улучшения состояния здоровья количество ингаляций сокращали до двух (утром и вечером) в течение 5-7 дней.
Черепахи получали теплые ванны с содержанием ромашки аптечной (Matricaria chamomilla) в дозе 50 г/л. Кроме того, ее использовали для промывания области носа с экспозицией 10-15 минут, в течение 5-7 дней. После процедур черепах тщательно высушивали и оставляли на термоковриках с постоянной температурой 32 °С.
При дневном кормлении ромашку аптечную добавляли 5 % в корм от общей массы корма.
Для общеклинических исследований и оценки фагоцитарной активности гетерофилов кровь стабилизировали 2,7 %-м трилоном-Б; для оценки факторов естественной резистентности применяли тест бактериального фагоцитоза гетерофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям Staphylococcus aureus (№ 209 Р) по И. В. Нестеровой и соавт. (1996). При этом определяли количество активно фагоцитирующих гетерофилов (%ФАН), поглотительную (ФЧ) и переваривающую способность (%П) гетерофильных гранулоцитов.
Полученные результаты были подвергнуты биометрической обработке по И. А. Ойвину, степень достоверности установлена по распределению Стьюдента.
Результаты исследований и их обсуждение. Клетки периферической крови сухопутных черепах, как и у всех рептилий, включают эритроциты, лейкоциты и тромбоциты. Морфология зрелых эритроцитов схожа у различных видов черепах - они имеют эллипсоидную форму с округлыми полюсами и однородную серо-голубую цитоплазму. Ядро этих эритроцитов удлиненное, с округлыми или неправильными полюсами, при этом длинная ось ядра ориентирована параллельно большему диаметру клетки. Плотный хроматин окрашивается в темно-фиолетовый цвет [6].
В крови черепах выделяют два типа тромбоцитов: овальные с четко выраженной мембраной и прозрачной цитоплазмой и почти прямоугольные с мелкими выступами и слабо базофильной цитоплазмой. Ядра тромбоцитов имеют округлоовальную форму и темный цвет [6, 7, 8].
Классификация лейкоцитов у рептилий представляет собой сложную задачу из-за морфологической изменчивости этих клеток. Тем не менее, количественный анализ профиля лейкоцитов является надежным индикатором иммунной функции, и большинство исследователей выделяют пять основных типов: гранулоциты (гетерофилы, эозинофилы, базофилы) и агранулоциты (моноциты и лимфоциты) [6, 7, 8].
Гетерофилы у сухопутных черепах представляют собой крупные клетки округлой или овальной формы с веретеновидными гранулами в цитоплазме и эксцентрично расположенным ядром. Эозинофилы, которые встречаются реже, имеют округлую форму, их гранулы более темные и круглые. Ядро этих клеток также эксцентрично расположено, однородного цвета с комковатым хроматином. Цитоплазма базофилов заполнена крупными округлыми гранулами, которые располагаются по периферии клетки и могут варьироваться по цвету от темно-фиолетового до темносинего. Моноциты характеризуются крупными бобовидными ядрами с бледным и тонким хроматином, находящимися в сине-серой цитоплазме, которая может содержать вакуоли или быть без них [6, 8].
У рептилий также существует уникальный тип лейкоцитов - азурофилы, представляющие собой округлые клетки моноцитарного происхождения с крупным слегка изрезанным или полушаровидным ядром, содержащим грубо глыбчатый темно-фиолетовый хроматин и азурофильные гранулы. Азурофилы относятся к молодым клеткам моноцитарного ряда и крайне редко встречаются у черепах. Лимфоциты имеют компактное темное ядро и тонкую кайму цитоплазмы, окрашенной в синий или бледно-фиолетовый цвет [6, 7, 8].
В ходе проведенных исследований нами установлено, что гематологические показатели крови у больных черепах в опытных группах находятся за пределами референтных показателей. При изучении лейкоцитарной формулы нами установлено, что у больных черепах в первой опытной группе, где применяли ромашку лекарственную, происходило увеличение количества моноцитов в 1,9 раза и, напротив, снижение сегментоядерных гетерофилов на 4,5 %, лимфоцитов - на 13 %, относительно клинически здоровых черепах.
У больных черепах во второй опытной группе, где применяли «Байтрил» происходило увеличение количества моноцитов в 1,5 раза и, напротив, снижение сегментоядерных гетерофилов на 9 %, лимфоцитов - на 32 %, относительно клинически здоровых черепах.
При сравнении показателей лейкоцитарной формулы крови черепах первой опытной группы, где применяли ромашку лекарственную, количество моноцитов и лимфоцитов было выше на 21 %, гетерофилов - на 4,8 %, относительно второй опытной группы, где применяли «Байтрил».
Нами установлено, что у черепах, больных респираторными заболеваниями, происходило подавление иммунобиологической реактивности организма. Так, в первой опытной группе у больных черепах наблюдалось снижение активных гетерофилов на 9,3 %, переваривающей способности гетерофильных гранулоцитов - на 23 % и, напротив, повышение поглотительной способности гетерофилов на 30 % и коэффициента мобилизации гетерофилов в 1,3 раза, по сравнению с клинически здоровыми черепахами.
Во второй опытной группе у больных черепах было ниже активных гетерофилов на 70 % (в 3,3 раза), переваривающей способности гетерофильных гранулоцитов на 40 %, коэффициента мобилизации гетерофилов - в 3 раза, и, напротив, произошло повышение поглотительной способности гетерофилов на 76 % (в 1,8 раза), по сравнению с клинически здоровыми черепахами.
В первой опытной группе, где применяли ромашку лекарственную, количество активных гетерофилов было выше на 67 % (в 3 раза), переваривающей способности гетерофильных гранулоцитов - на 22 %, коэффициента мобилизации гетерофильных гранулоцитов - в 4 раза и, напротив, была ниже поглотительная способность гетерофилов на 35 %, относительно второй опытной группы, где применяли «Байтрил».
